[HPLC] 순상? 역상? Normal ? Reverse

◈ Normal phase

① 컬럼 : 극성 컬럼

② 이동상 : hexane, heptane, isooctane과 같은 비극성 용액

③ 분리원리 : 시료 작용기의 극성도에 의해 분리

④ 충전물질 : SiOH, -CN, -NH2 만약 H2O와 같은 극성 물질을 사용하게 되면 

시료와 충전 물질과의 강한 수소 결합으로 인한 tailing 현상으로 

분리가 제대로 이루어지지 않으며 컬럼 수명 또한 짧아지는 단점이 있다.



◈ Reverse phase

① 컬럼 : silica 표면에 C18과 같은 비극성 작용기를 결합시킨 비극성 컬럼

② 이동상 : 물/아세토나이트릴이나 물/메탄올과 같은 극성 용매

③ 분리원리 : 수용액과 유기 용매 사이의 용해도 차이에 의해 분리

④ 용출순서 : 극성인 물질이 가장 빨리 나오고 비극성인 물질이 늦게 용출된다. 

만일 이동상에 물의 비율을 높여 극성도를 증가시킨다면 

비극성 시료는 컬럼에 더 오래 머무르고 늦게 나오려 하므로 

전체적인 분석시간이 길어지게 된다.